Болезнь кленового сиропа является наследственным заболеванием, сутью которого является нарушение расщепления аминокислот с разветвленной цепочкой вследствие полного отсутствия или значительного снижения ферментативной активности.
В результате этого врожденного дефекта в моче и в крови появляется большое количество этих аминокислот (лейцина, валина, изолейцина) и токсичные продукты метаболизма этих белков. Наиболее патогенное действие имеет накопление лейцина.
Моча вследствие этого приобретает характерный сладковатый запах кленового сиропа. Отсюда и название болезни или синдрома. Имеются и другие названия:
- разветвленно-цепочечная кетонурия;
- лейциноз.
Тип наследования лейциноза аутосомно-рецессивный. Это значит, что ребенку болезнь может передаться только в тех случаях, если оба родителя будут являться носителями мутированного гена. Причем вероятность рождения детей-носителей мутантного гена – 50 %, здорового ребенка (не имеющего мутантного гена) – 25 %, равно, как и ребенка с лейцинозом – 25 %.
Частота рождения детей с лейцинозом (независимо от пола) – 1 случай на 200-300 тысяч новорожденных.
Содержание:
- 1 Симптомы
- 2 Резюме для родителей
- 3 Болезнь кленового сиропа
- 4 Болезнь кленового сиропа(лейциноз)
- 5 Что такое лейциноз – причины сладкого запаха от мочи ребенка
- 6 Болезнь кленового сиропа
- 7 Причины болезни кленового сиропа
- 8 Симптомы болезни кленового сиропа
- 9 Лечение болезни кленового сиропа
- 10 Диагностика нарушений обмена пуринов и пиримидинов
Симптомы
Различают несколько форм заболевания, которые отличаются генетическими особенностями, симптомами и сроками их проявления. Самой распространенной и наиболее тяжелой формой является классическая, которая проявляется уже в первые 2 недели с момента появления на свет. Другие формы заболевания считают менее тяжелыми, симптомы их возникают позже. Однако при отсутствии лечения любая форма приводит к тяжелым физическим и психическим последствиям.
Проявления различных форм болезни:
- Классическая форма обнаруживается практически после рождения младенца (спустя 3-14 дней). Активность ферментов составляет не более 2 % или совсем отсутствует. Ребенок становится вялым, отказывается от кормления, отмечается повторяющаяся рвота, снижение давления. Плач у малютки тихий. Вес ребенок не набирает, а, наоборот, теряет.
Развивается обезвоживание, панкреатит. Периодически отмечаются внезапные остановки дыхания (апноэ). Уровень глюкозы в крови снижен. Могут развиваться судороги (тонические и клонические) и другие неврологические симптомы. Вследствие повышенного тонуса мышц ножки ребенка скрещиваются, а в последующем неестественно вытягивается и прогибается все тело.
Наиболее характерным симптомом является специфический запах мочи, напоминающий запах жженого сахара или кленового сиропа. Проявления нарастают стремительно. Возможно нарушение сознания (вплоть до коматозного состояния), летаргический сон. Прогноз неблагоприятный.
- Периодическая форма развивается при активности ферментов 5-20 %. Вначале новорожденный правильно развивается, а первые проявления возникают в период с 5 месяцев до 2 лет или даже позже. Спровоцировать их возникновение могут инфекция, вакцинация, повышенное содержание полноценных белков в рационе малыша.
Симптомами являются рвота, нарастающее обезвоживание, нарушение координации, судороги. При отсутствии медицинской помощи наступает кома, возможен неблагоприятный исход.
- Промежуточная форма развивается при диапазоне активности ферментов 3-30 %. Этот вариант болезни встречается редко, проявляясь у деток с 5 месяцев до 7 лет. Протекает малосимптомно или бессимптомно, возможна незначительная задержка развития.
Могут возникать кратковременные приступы нарушения координации движений у ребенка с характерным запахом мочи после ОРЗ, стресса, нарушения питания и др.
Между приступами состояние не нарушено. Болезнь выявляется случайно при обследовании по повышенному уровню в крови и моче указанных аминокислот.
- Тиаминзависимая форма по характеристике не отличается от промежуточной. При лечении витамином В1 уровень аминокислот значительно снижается.
Диагностика лейциноза не представляет трудности – верифицировать диагноз можно по результатам биохимических анализов крови и мочи при выявлении в них повышенного содержания лейцина, изолейцина, валина.
При классическом варианте заболевания развивается тяжелое отравление организма, требующее проведения детоксикации. Если обычные методы дезинтоксикационной терапии оказываются неэффективными, то применяются такие методы лечения, как гемодиализ (перитонеальный диализ) – очищение крови от токсических продуктов, образующихся при распаде аминокислот.
После получения эффекта и достижения состояния компенсации в организме дальнейшая терапия состоит в назначении специального лечебного питания – диеты с ограниченным содержанием белка.
Аминокислоты лейцин, валин являются незаменимыми, в организме они не синтезируются, поступают только с белковыми продуктами. Исключив белки из рациона, можно добиться снижения этих аминокислот в моче и крови.
Дитя переводится на искусственное вскармливание специальной смесью, которая содержит остальные 18 незаменимых аминокислот в тех пропорциях, которые соответствуют грудному молоку. Жиры ребенок получает в виде входящего в смесь кукурузного масла, а декстрин-мальтоза обеспечивает поступление углеводов. Смесь также содержит микроэлементы и витамины. Ребенка наблюдают педиатр и диетолог, проводится регулярный лабораторный контроль.
После исчезновения всех проявлений болезни могут постепенно вводить в рацион коровье молоко в небольшом количестве:
- С 4-5 месяцев врач может разрешить постепенное введение овощей и фруктов, содержащих белки.
- На 8-м месяце вводят желатин, так как в его состав эти аминокислоты не входят.
- С годовалого возраста ребенку разрешают употреблять коровье молоко не больше 120 мл/сутки.
Специальная диета назначается пожизненно. Для питания ребенка используют белковые препараты, в составе которых находятся заменители аминокислот, а аминокислоты с разветвленной цепью исключены.
Такие препараты позволяют пациентам питаться, не нанося ущерба здоровью. Они дают возможность избежать тяжелых последствий болезни со стороны нервной системы.
Резюме для родителей
Наследственная патология в виде лейциноза, к счастью, является редким заболеванием. Однако последствия его в случае развития могут быть очень серьезными, не исключая летальный исход. Если не будет проведено лечение, то ребенок, даже при нетяжелом течении болезни кленового сиропа, может иметь серьезные последствия со стороны нервной системы.
Уберечь его от них может только строгое соблюдение предписанной диетологом диеты, которая является основным лечением заболевания. Понимая это, родители смогут вырастить ребенка без отставания от сверстников в физическом и психическом развитии.
Болезнь кленового сиропа
Лейцино́з (разветвлённоцепочечная кетонурия, болезнь мочи с запахом кленового сиропа) — врождённое нарушение обмена, ферментопатия.
Содержание
Характеристика
Наследственное заболевание с аутосомно-рецессивным типом наследования встречается с частотой 1 на 120—300 тыс.
Первичный биохимический дефект заключается в отсутствии или резком снижении активности ферментной системы, обеспечивающей окислительное декарбоксилирование трёх аминокислот — лейцина, изолейцина и валина. В результате в организме накапливаются эти аминокислоты и их предшественники. Наиболее патогенно накопление лейцина.
Заболевание протекает тяжело и часто заканчивается летально. У детей отмечается задержка развития, угнетение ЦНС, больные могут впадать в летаргию. Характерна гипогликемия и гипотония, имеется кетоацидоз, рвота.
Варианты заболевания
- классический
- промежуточный
- интермиттирующий
- тиаминзависимый
- E3-дефицитная форма с лактоацидозом.
Диагностика
Характерный признак
Напоминающий кленовый сироп своеобразный запах мочи больных, в которой обнаруживается присутствие аминокислот с разветвлённой цепью.
Лечение и профилактика
При лечении используют смеси аминокислот и белковые гидролизаты, освобождённые от аминокислот с разветвлённой цепью.
Wikimedia Foundation . 2010 .
Смотреть что такое «Болезнь кленового сиропа» в других словарях:
БОЛЕЗНЬ КЛЕНОВОГО СИРОПА — (maple syrup urine disease) врожденный дефект метаболизма аминокислот, приводящий к появлению в моче большого количества валина, лейцина, изолейцина и аллоизолейцина, вследствие чего она приобретает запах кленового сиропа. Для лечения заболевания … Толковый словарь по медицине
болезнь кленового сиропа — (син. валинолейцинурия) наследственная Б., обусловленная нарушением обмена валина, лейцина и изолейцина, проявляющаяся с 3 5 го дня жизни рвотой, судорогами, расстройствами дыхания, цианозом, запахом мочи, напоминающим запах сиропа сахарного… … Большой медицинский словарь
Болезнь Кленового Сиропа (Maple Syrup Urine Disease) — врожденный дефект метаболизма аминокислот, приводящий к появлению в моче большого количества валина, лейцина, изолейцина и аллоизолейцина, вследствие чего она приобретает запах кленового сиропа. Для лечения заболевания следует соблюдать строгую… … Медицинские термины
Болезнь мочи с запахом кленового сиропа — Лейциноз МКБ 10 E71.0 МКБ 9 270.3 OMIM … Википедия
Болезнь Феллинга — Фенилкетонурия Фенилаланин МКБ 10 E70.0 МКБ 9 … Википедия
Менкеса болезнь — (Menkes J., 1954). Врожденное наследственное заболевание, отличающееся прогрессирующим течением и связанное с нарушением обмена аминокислот – лейцина, изолейцина и валина. В связи с недостаточностью их декарбоксилирования эти аминокислоты в… … Толковый словарь психиатрических терминов
НЕДОСТАТОЧНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ — мед. Синдромы врождённых нарушений обмена веществ встречаются редко, но оказывают значительное влияние на физическое, интеллектуальное, психическое развитие и качество жизни (например, фенилкетонурия, гомоцистинурия, гликогенозы, синдромы ломкой… … Справочник по болезням
Паренхиматозные диспротеинозы — дисметаболические (дегенеративные, дистрофические) процессы с преимущественным нарушением обмена белков, развивающиеся первично в паренхиматозных клетках органов. Содержание 1 Классификация 2 Зернистая дистрофия … Википедия
Читайте также: Апластическая анемия неуточненная
Клинический анализ мочи — Общий анализ мочи лабораторное исследование мочи, проводимое для нужд медицинской практики, как правило, с диагностической целью. Включает органолептическое, физико химическое и биохимическое исследования, а также микробиологическое… … Википедия
Лейциноз — МКБ 10 E71.071.0 МКБ 9 270.3270.3 OMIM … Википедия
Источник: dic.academic.ru
Болезнь кленового сиропа(лейциноз)
Орфанные (редкие) заболевания
Общее описание
БКС передается потомству по аутосомно-рецессивному типу, что предполагает получение дефектного гена как от отца, так и от матери. Происходящее при данной патологии нарушение декарбоксилирования указанных выше аминокислот, приводит к их накоплению в организме с образованием токсических продуктов распада, вплоть до трупного яда. При появлении на свет младенец выглядит вполне здоровым, однако, в ближайшие дни развиваются симптомы тяжелейшей интоксикации, без коррекции которых ребенок вскоре погибает. Наиболее тяжелой является классическая форма заболевания.
Клиническая картина
Появляются в течение 2-х недель после рождения:
- плохой аппетит,
- срыгивание,
- рвота,
- вялость,
- судороги,
- своеобразное скрещивание нижних конечностей,
- опистотонус,
- специфический запах мочи, пота и ушной серы,
- различные формы нарушения сознания,
- нарушения дыхания.
Диагностика болезни кленового сиропа
Клиническую симптоматику дополняют данные лабораторных и инструментальных методов исследования:
- Повышение в крови уровня лейцина, изолейцина и валина.
- Детекция в моче лейцина, изолейцина, валина в высоких концентрациях.
- Положительная реакция мочи на тест с 2,4-динитрофенилгидразином.
- Молекулярно-генетическое исследование: выявляется мутация, наиболее частая в гене BCKDHB.
- КТ и МРТ головного мозга: отек, гипомиелинизация, атрофия головного мозга.
Лечение болезни кленового сиропа
В остром периоде БКС проводится элиминация разветвленных аминокислот и их мета-болитов с помощью гемодиализа, что позволяет снять симптомы интоксикации в течение суток. В последующем пациентов переводят на синтетическую диету без разветвленных аминокислот, для чего ребенка переводят на искусственное вскармливание. Основным компонентом терапии служит малобелковая диетотерапия и тиамин на протяжении не менее 3-х недель. Дополнительно назначают левокарнитин на срок до полугода, другие витамины группы В в возрастных дозах. По показаниям — антиконвульсанты, ноотропы. Диетические же ограничения, должны соблюдаться пожизненно. При неуспешности кон-сервативной терапии возможна трансплантация печени.
Основные лекарственные препараты
Имеются противопоказания. Необходима консультация специалиста.
- Тиамин (восполняющее дефицит витамина B1, метаболическое, иммуностимулирующее, антиоксидантное, ганглиоблокирующее средство). Режим дозирования: назначают внутрь, начиная с дозы 10 мг/сут сроком на 2 недели. В дальнейшем доза может быть увеличена до 50-300 мг/сут.
- Левокарнитин (препарат вит. В, анаболическое, антигипоксическое, стимулирующее жировой обмен, регенерирующее средство). Режим дозирования: назначают внутрь в дозе 50-75 мг/кг/сут (в зависимости от возраста) в 2-3 приема. Курс лечения 3-6 мес.
- Нутриген 14 (продукт диетического питания для детей первого года жизни с БКС). Режим дозирования: начальные дозы продукта составляют 1/5-1/10 часть от необходимого суточного количества. Продукт вводится в рацион постепенно в течение 10-14 дней.
Источник: online-diagnos.ru
Что такое лейциноз – причины сладкого запаха от мочи ребенка
Болезнь кленового сиропа – это врожденный недостаток метаболизма, в результате которой организм не в состоянии правильно расщеплять три аминокислоты (лейцин, изолейцин, валин).
Читайте также: Синдром Эванса
Заболевание имеется, примерно, у 1 185 000 детей по всему миру. Название болезни происходит от характерного – сладкого, похожего на запах кленового сиропа – запаха мочи детей, страдающих этой болезнью.
Причины болезни кленового сиропа
Болезнь кленового сиропа – это унаследованное метаболическое нарушение. Наследуется аутосомно-рецессивном порядке, т.е. для того, чтобы появилась у ребенка оба его родителя должны быть носителями дефектного гена, но вовсе не должны болеть.
Ребенок же заболеет, только тогда, когда унаследует две бракованные копии гена обоих родителей. Это вызовет у такого ребенка отсутствие фермента дегидрогеназы α-кетокислот аминокислот с разветвленной цепью (BCKAD).
В следующий раз.
Этот фермент участвует в распределении аминокислот, которые присутствуют в различных видах пищевых продуктов (особенно в блюдах, богатых белками, таких как молоко, мясо и яйца). Это приводит к накоплению в организме ребенка аминокислот с разветвленными цепями и продуктов их разложения (α-кетокислот), очень токсичных для мозга и других органов.
Симптомы болезни кленового сиропа
С самого раннего детства, заболевание характеризуется рвотой, нехваткой энергии (вялость), задержкой развития, если его не лечить, может привести к судорогам, коме и даже смерти.
Существует несколько форм этого заболевания:
- классическая – новорожденный рождается в хорошем состоянии, симптомы появляются в течение первых нескольких дней, сначала в виде нежелания принимать пищу, уменьшением всасывания, апатией, а затем снижением массы тела, периодических апноэ, также могут возникнуть судороги и даже кома. Активность фермента BCKAD составляет от 0 до 2% от нормы.
- периодическая – первоначально развитие ребенка идет правильно, первые признаки можно заметить около 5 месяца и до 2 лет, или позже, обычно при инфицировании, вакцинации или резком увеличении содержания полноценного белка в рационе ребенка. Активность фермента BCKAD составляет около 5-20% нормы.
- промежуточная – редкий вид, протекает бессимптомно или с незначительной задержкой развития, обнаруживается случайно в виде незначительно, но хронически повышенной концентрации аминокислот с разветвленными цепями. Активность BCKAD находится в пределах 3-30% от нормы.
- тиаминзависимый – форма клинических проявлений аналогична промежуточной форме. Лечение витамином В1 приводит к выраженному снижению концентрации аминокислот с разветвленными цепями.
Лечение болезни кленового сиропа
Когда болезнь проявляется клинически, пациенты, как правило, впадают в состояние тяжелого отравления. Естественные механизмы детоксикации организма, зачастую оказываются недостаточными, поэтому требуется применение таких методов, как гемодиализ или перитонеальный диализ для очищения организма от токсических продуктов распада аминокислот.
При достижении компенсации метаболических расстройств, дальнейшие действия состоят в применении специальной диеты с пониженным содержанием белка. Белок в рационе вашего ребенка, следует вводить постепенно в виде пищи в виде грудного молока или модифицированного молока.
Очень важно соблюдать диету, чтобы избежать повреждения нервной системы. Требуется частое исследование уровня аминокислот в крови, а также мониторинг симптомов дефицита белка, вызванных используемой диетой. Необходим строгий контроль диетолога и врача, а также сотрудничество со стороны родителей.
Источник: sekretizdorovya.ru
Болезнь кленового сиропа
Болезнь кленового сиропа, или лейциноз, – очень сложное и отнюдь не редкое наследственное заболевание. На каждые 120—300 тысяч младенцев рождается один с болезнью кленового сиропа. Заболевание характеризуется резким снижением или даже отсутствием ферментной активности организма, что приводит к нарушению окислительного декарбоксилирования трёх аминокислот: изолейцина, валина и лейцина.Декарбоксилирование – это процесс, при котором происходит отщепление от аминокислот карбоксильной группы молекулы карбоновой кислоты. Этот процесс необходим для нормального метаболизма аминокислот. Если нарушено окисление декарбоксилирования изолейцина, валина и лейцина, то происходит их патологическое накопление и распад в организме. А так как организм умеет избавляться от перенасыщения аминокислотами только одним методом – выведением их с мочой, то это приводит к появлению изолейцина, валина и лейцина в урине (моче). Но в результате того, что аминокислоты очень быстро накапливаются, в организме начинает происходить их распад. Продукты распада аминокислот очень токсичны. В частности, к ним относятся биогенные амины (трупный яд).
Читайте также: Нарушения обмена жирных кислот
Причины развития болезни кленового сиропа
Заболевание передаётся аутосомно-рецессивным путём наследования, то есть патологический ген наследуется от обоих родителей. Как правило, в этом случае и мать, и отец ребёнка являются носителями гена.
Симптомы болезни кленового сиропа
Накопление аминокислот в организме происходит достаточно быстро, поэтому первые симптомы проявляются уже на 3–14 день жизни малыша. Он отказывается от еды, тихо плачет, часто срыгивает, в некоторых случаях может быть рвота. Большое количество изолейцина, валина и лейцина в моче приводит к тому, что она приобретает специфический запах кленового сиропа, что и дало название болезни. Впоследствии, если не назначено лечение, начинаются сначала лёгкие судороги отдельных мышц, а потом повышение тонуса всех мышц. Тело ребёнка неестественно вытягивается, а ножки скрещиваются. В дальнейшем происходит нарушение сознания и дыхания. Если лечение назначено поздно, то такие дети сильно отстают в развитии, у них отмечается угнетение ЦНС, они могут впадать в летаргию.
Диагностика болезни кленового сиропа
— Анализ мочи на определение в ней изолейцина, валина и лейцина. Для этого проводят селективный скрининг с 2,4-динитрофенилгидразином. Результат будет положительный.— Анализ ДНК на определение мутантного гена хоть и является показательным, но обычно не проводится, так как анализа мочи бывает достаточно для постановки диагноза.
Лечение болезни кленового сиропа
Направлено на снижение уровня изолейцина, валина и лейцина в крови. Так как все эти аминокислоты являются незаменимыми, то есть не синтезируются в организме и поступают только из белковых продуктов питания, то снижение их концентрации в организме возможно методом исключения из рациона питания данных продуктов. Для этого изначально ребёнок переводится на искусственное вскармливание. Его едой становится микстура, содержащая 18 аминокислот ровно в той пропорции, в которой они содержатся в материнском молоке. Но вместо углеводов добавляется декстрин-мальтоза, а жиры заменяются кукурузным маслом.После того как проходят симптомы, разрешается введение в рацион питания коровьего молока в небольшом количестве. Содержащие белки овощи и фрукты вводятся в очень маленьких количествах с 3–5 месяцев. К 8 месяцам разрешатся введение желатина, так как он не содержит изолейцина, валина и лейцина. После года суточная норма коровьего молока не должна превышать 120 мл. Впоследствии назначается пожизненная соответствующая диета.
Профилактика болезни кленового сиропа
Методов профилактики не существует. Единственное, что возможно, – это экстракорпоральное оплодотворение.
Источник: www.happy-giraffe.ru
Причины болезни кленового сиропа
Болезнь кленового сиропа – это унаследованное метаболическое нарушение. Наследуется аутосомно-рецессивном порядке, т.е. для того, чтобы появилась у ребенка оба его родителя должны быть носителями дефектного гена, но вовсе не должны болеть.
Ребенок же заболеет, только тогда, когда унаследует две бракованные копии гена обоих родителей. Это вызовет у такого ребенка отсутствие фермента дегидрогеназы α-кетокислот аминокислот с разветвленной цепью (BCKAD).
В следующий раз...
Этот фермент участвует в распределении аминокислот, которые присутствуют в различных видах пищевых продуктов (особенно в блюдах, богатых белками, таких как молоко, мясо и яйца). Это приводит к накоплению в организме ребенка аминокислот с разветвленными цепями и продуктов их разложения (α-кетокислот), очень токсичных для мозга и других органов.
Симптомы болезни кленового сиропа
С самого раннего детства, заболевание характеризуется рвотой, нехваткой энергии (вялость), задержкой развития; если его не лечить, может привести к судорогам, коме и даже смерти.
Существует несколько форм этого заболевания:
- классическая – новорожденный рождается в хорошем состоянии, симптомы появляются в течение первых нескольких дней, сначала в виде нежелания принимать пищу, уменьшением всасывания, апатией, а затем снижением массы тела, периодических апноэ, также могут возникнуть судороги и даже кома. Активность фермента BCKAD составляет от 0 до 2% от нормы.
- периодическая – первоначально развитие ребенка идет правильно, первые признаки можно заметить около 5 месяца и до 2 лет, или позже, обычно при инфицировании, вакцинации или резком увеличении содержания полноценного белка в рационе ребенка. Активность фермента BCKAD составляет около 5-20% нормы.
- промежуточная – редкий вид, протекает бессимптомно или с незначительной задержкой развития, обнаруживается случайно в виде незначительно, но хронически повышенной концентрации аминокислот с разветвленными цепями. Активность BCKAD находится в пределах 3-30% от нормы.
- тиаминзависимый – форма клинических проявлений аналогична промежуточной форме. Лечение витамином В1 приводит к выраженному снижению концентрации аминокислот с разветвленными цепями.
Лечение болезни кленового сиропа
Когда болезнь проявляется клинически, пациенты, как правило, впадают в состояние тяжелого отравления. Естественные механизмы детоксикации организма, зачастую оказываются недостаточными, поэтому требуется применение таких методов, как гемодиализ или перитонеальный диализ для очищения организма от токсических продуктов распада аминокислот.
При достижении компенсации метаболических расстройств, дальнейшие действия состоят в применении специальной диеты с пониженным содержанием белка. Белок в рационе вашего ребенка, следует вводить постепенно в виде пищи в виде грудного молока или модифицированного молока.
Очень важно соблюдать диету, чтобы избежать повреждения нервной системы. Требуется частое исследование уровня аминокислот в крови, а также мониторинг симптомов дефицита белка, вызванных используемой диетой. Необходим строгий контроль диетолога и врача, а также сотрудничество со стороны родителей.
Диагностика нарушений обмена пуринов и пиримидинов
Пуриновые и пиримидиновые основания являются фрагментами нуклеиновых кислот, участвуют в кодировании и передаче наследственной информации. Производные пуринов и пиримидинов входят в состав многих биологически активных веществ — алкалоидов, коферментов, витамина B1 и др.
Наследственные дефекты обмена пуринов и пиримидинов встречаются редко и обусловлены врожденной недостаточностью ферментов. При патологии обмена нуклеотидов в первые же месяцы жизни у ребенка отмечается задержка развития двигательных навыков, а также непроизвольные движения мышц, повышенный тонус мышц стоп, спазмы конечностей; болезнь сопровождается олигофренией.
Ранняя диагностика наследственной патологии обмена нуклеотидов проводится в лаборатории «Диалаб». Мы выявляем нарушения обмена пуринов, пиримидинов и других фрагментов нуклеиновых кислот (22 показателя!) высокоточными методами высокоэффективной жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии.